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支原体衣原体检测

  • 发布时间:2014-07-24
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支原体衣原体广泛存在于自然界,人体中发现支原体 、衣原体不足为奇,人体免疫力下降,它们都可能繁殖发病。

衣原体是一类能通过滤菌器,衣原体严格细胞内寄生,衣原体在宿主细胞中有独特的生活周期的微生物,衣原体含有去氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两种类型的核酸 ,衣原体以二分裂方式繁殖,衣原体完成一次周期约需48—72h,衣原体在感染细胞内增殖形成各种形态的包涵体。

支原体是一种能独立生活的小简单的原核生物。尿素分解支原体为尿素支原体中 确认的一个种,其特点为具有尿素活性酶。人型支原体为支原体属。这二个属均属于同一个科,其特征是生长时需胆固醇或其它 固醇,解脲支原体生长需要尿素。
 


一、检查方法

1 快速抗原检测:多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体酶标抗体18G及底物进行比色定量检测这两种方法简便敏感.

2 血常规:周围血白细胞计数一般正常嗜酸性粒细胞增多.

3 PcR技术 普通PcR技术检测肺炎衣原体特异性DNA具有快速简便特异的优点敏感性高于细胞分离技术但在检测咽拭于标本中效果不够理想用套式PcR(nPcR)检测可显著提高其敏感性.

4 x线检查:衣原体肺炎胸片无特异性多为单侧下叶浸润表现为节段性肺炎严重者呈广泛双侧肺炎沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润过度充气征比较常见偶见大叶实变.

5 血清学检查 采用补体结合试验着恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高 4倍或4倍以上即有诊断意义但无早期诊断意义微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体.

6 直接涂片镜检:取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位标本做涂片进行GZmesa染色原体染成红色始体染成深蓝色沙眼衣原体包涵体因含有糖原801染色染成褐色.

7 衣原体分离 肺炎衣原体培养好用Hela细胞或Hep一2细胞一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本及时接种目前衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA)该技术敏感性高特异性强如能早期采集标本可在48h内获得阳性结果。 》》我要预约做检查!


二、支原体和衣原体检验

支原体主要存在于人和动物的腔道粘膜。支原体生殖道感染与非淋菌性尿道炎或宫颈炎有关,此外可引起前列腺炎、附睾炎、输卵管炎、流产、死产和不育症等。能引起人类非淋菌性尿道炎的主要有解脲支原体、人型支原体、生殖支原体。在正常人的泌尿生殖道中也可能有支原体寄生。

实验室诊断主要采用液体分离培养和固体分离培养法

[原理]

解脲支原体(Uu)具有尿素酶,能分解尿素产氨,使含酚红指示剂Uu液体培养基pH值升高变碱性,液体颜色由黄变红。

人型支原体(Mh)具有精氨酸酶,能分解精氨酸产氨,使含酚红指示剂的Mh液体培养基pH值升高,液体颜色由黄变红。

生殖支原体在含5%CO2环境中的固体培养基上,可形成煎蛋状集落。但是,由于生殖支原体生长缓慢,而且需要的营养成分复杂,因此,分离培养的难度较大。目前主要靠DNA探针及PCR技术检测生殖支原体。

[方法]

1.标本采集:

男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。

尚可用前列腺液、精液、尿液离心沉淀物作标本。

2.接种:将标本洗入Uu或Mh液体培养基,或用滤菌器过滤接种。

3.培养:置370C恒温箱孵育1~3天,每日观察培养基颜色变化。


衣原体

[结果]

液体培养基由黄色变红色,清亮透明可初步判断为Uu或Mh阳性。

衣原体:专性细胞内寄生,并有近似的细胞壁结构,含DNA、RNA及核蛋白体,具有独特生活周期的原核细胞型微生物。

衣原体的发育周期分为原体和始体两个阶段。原体具有传染性,可在宿主细胞外存活,始体仅存在于细胞内无传染性。能引起人类非淋菌性尿道炎的主要有沙眼衣原体。

实验室诊断主要是衣原体抗原检测(快速胶体金法)

[原理]

衣原体脂多糖抗原与胶体金标记的单克隆抗体结合形成复合物,复合物经虹吸作用而移动,在结果窗被含有的单克隆抗衣原体抗体捕获而形成黑色沉淀线。

[方法]

1、取材:

男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。

女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。

尚可用尿道取材、溃疡部位或腹股沟横痃抽吸液。

2、标本处理:将拭子置于采集管内加入提取缓冲液于刻度,800C水浴10分钟,放置室温冷却至少5分钟。

3、检测:滴加5滴标本提取物于试验板的检测窗,静置15分钟,读取结果。

[结果]

结果窗出现一条黑线,表明试验阳性,如无,试验阴性。

结果窗出现一弱黑线,表明结果可疑。

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